Le groupe des douze premières signatures de la Convention de Genève s'accrut promptement, par l'adjonction de celles de presque toutes les puissances européennes qui, stimulées pour la plupart par le Comité international, se sentirent portées à se ranger sous la nouvelle loi. Cependant, lorsqu'éclata la guerre de 1866 entre la Prusse, l'Italie et l'Autriche, plusieurs hésitaient encore à se prononcer en sa faveur. Les belligérants notamment n'étaient pas d'accord sur ce point, mais les expériences de cette campagne, la décision prise par la Prusse et par l'Italie de mettre tous leurs adversaires indistinctement au bénéfice de la Convention, et les démarches multipliées du Comité de Genève, déterminèrent les plus récalcitrants eux-mêmes à suivre l'impulsion générale.